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酶标仪在粪便钙卫蛋白检测过程中的应用

点击次数:632发布时间:2017-07-26

酶标仪应用双抗体夹心法,基于不同位点的两种单 克隆抗-人钙卫蛋白抗体。标准品、质控品和稀释后的待测样本加入到具有高亲和力的单克隆抗-人钙卫蛋白抗体包被的微孔板微孔内。在*次孵育步骤中,样本中钙卫蛋白被固相抗体捕获。加入酶联物后第二次孵育时,形成以下复合体:捕获抗体-人钙卫蛋白-酶标抗体结合物。接着加入TMB底物进行显色,加入酸液终止液终止显色反应,溶液变成黄色。黄色亮度与样本中钙卫蛋白浓度成正比。zui后在酶标仪450nm波长处测量吸光度。做出标准品浓度对相应OD值的标准曲线,在其上计算出样本浓度。有些试剂盒厂家采用双波长检测,酶标仪450nm(单波长测量时使用450nm,如果zui高标准品的吸光度系数超过酶标仪的范围,应直接于450nm(参考630nm620nm)双波长测量。

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