PT全波长酶标仪是一款集紫外可见光吸收、荧光、化学发光等多种检测模式于一体的高精度分析仪器,广泛应用于生命科学、临床诊断、药物研发及食品安全等领域。
该仪器具备宽波长覆盖能力,通常可检测1901000nm范围内的光信号,满足不同物质的特征吸收检测需求,如核酸在260nm、蛋白质在280nm处的特征吸收,以及ELISA实验中450nm、630nm等波长的读数。其采用高品质光栅单色器技术,波长精度可达±1nm以内,带宽可调,有效减少杂散光干扰,提高检测特异性。同时,配备高灵敏度探测器,如光电倍增管(PMT)或CCD阵列检测器,能捕捉微弱光信号,检测下限可达pg级,满足微量样品分析需求。
1、操作前准备
确保待检测样品(如ELISA板、核酸溶液、细胞悬液等)已按实验方案处理完毕,且微孔板内无气泡、液滴挂壁。若有气泡,可轻轻敲击板壁去除;挂壁液滴需用纸巾吸干边缘。
准备空白对照、标准品、质控品,按预设布局排列在微孔板中(建议记录孔位布局,避免混淆)。
确认酶标仪电源线连接正常,开机前检查样品室是否清洁(无灰尘、液体残留),必要时用无尘布擦拭。若实验需温控(如37℃孵育)或震荡,提前确认仪器相关功能正常(如温控模块是否能达到设定温度)。
打开电脑及酶标仪电源,启动配套操作软件,等待仪器自检完成(通常显示“就绪”状态)。
2、放置酶标板
仪器自检后,酶标板托架会自动伸出,注意仪器前部不要放置物品,以免影响托架的伸出。
将酶标板按数字正确的方向放在托架上。点击仪器下部最右侧的“move plate in”图标,酶标板将自动进入仪器中,注意不要用手动推入。
3、设置检测参数
根据实验类型在软件中选择对应的检测模式,并设置检测波长、带宽等参数。对于吸收光检测(如ELISA、核酸定量),需设置检测波长和带宽;对于荧光检测,需设置激发波长、发射波长,并选择顶部/底部读数;对于化学发光检测,无需设置波长,直接选择“化学发光”模式,注意关闭样品室光源以减少干扰;对于动力学检测,需额外设置检测时间间隔、总检测时长,并开启温控(若需恒温反应)。
选择微孔板规格(如96孔板、384孔板),并定义检测范围(如“全板检测”或指定特定孔位,如A1H12)。若需排除边缘效应或部分孔位,可在软件中标记“不检测”孔。
若反应需恒温(如酶促反应在37℃),设置目标温度(误差通常±0.1℃),并等待仪器预热至设定温度。若检测前需混匀样品,设置震荡模式(如线性震荡)、转速(如500rpm)和时间(如10秒)。对于吸收光检测,可开启“双波长检测”,通过参比波长扣除背景干扰(如微孔板划痕、气泡),提高数据准确性。
4、开始测量
在屏幕上选“Start measurement”,点击绿色箭头。
在“Select a File”窗口左上角选“Obtain Raw Date”,然后点击绿色箭头。
在“plate”栏中的“plate definition”下拉条中,对板的类型进行选择,如平底透明板等。
在“Wavelength”栏中“Measurement”项输入测定波长值;如需扣除背景波长,则在“Reference”项选中并输入背景波长值。
在“Part of plate”栏中,用鼠标左键拉框选择要测定的样品孔(使待测定的样品孔变为黄色),注意待测孔只可横向或纵向连续选择,不可以被间断。
点击绿色箭头,仪器开始自动测定。
5、记录与分析
根据需要,定期记录反应后的光学密度,并将其转换为反应速率。通过比较不同实验的结果,可以评估反应条件和影响反应速率的因素。
