半自动酶标分析仪是一种基于酶联免疫吸附实验(ELISA)原理的检测设备,它主要用于生物样本中待测物的定性和定量分析。其基本工作原理是通过酶标记的抗体与待测样品中的抗原特异性结合,形成抗原-抗体复合物。随后加入特定的底物与酶反应,产生颜色变化或荧光信号。这些信号与待测物的浓度成正比,因此可以通过光电比色法或荧光检测法对这些信号进行定量分析,从而实现对样品中特定成分的定性和定量检测。
半自动酶标分析仪的主要功能:
1、吸光度(Absorbance)检测(核心功能)
基本原理:这是酶标仪最基础和z常用的功能。它通过特定波长的光源照射微孔板中的样品,检测样品对光的吸收程度(即吸光度值,OD值)。
应用:主要用于比色法检测,是ELISA试验的标准检测方法。通过测量反应产物的颜色深浅(吸光度),可以定量分析抗原、抗体、蛋白质、核酸、细胞因子、激素、药物残留等目标物质的浓度。
波长选择:通常配备多个固定滤光片(如405nm,450nm,492nm,630nm等),用户可根据实验需求手动选择合适的检测波长。
2、微孔板读数
核心任务:能够对标准的96孔板(最常见)、48孔板、24孔板等进行快速、批量的光学信号读取。
读取模式:支持单波长、双波长(用于扣除背景干扰)等多种读取模式。
3、数据处理与分析
内置计算:仪器通常配备显示屏和简单操作系统,能进行基本的数据处理,如:
计算平均值、标准差。
进行线性、二次曲线、四参数拟合等标准曲线计算。
根据标准曲线自动计算未知样本的浓度。
结果输出:可通过USB、RS232等接口将原始数据和分析结果传输到计算机,或直接连接打印机输出报告。
4、振荡混匀功能
内置振荡器:许多半自动酶标仪底部或平台内置有振荡功能(线性振荡、圆周振荡或轨道振荡)。
作用:在读数前,可对微孔板进行短暂振荡,使孔内液体充分混匀,确保反应均一,提高检测结果的准确性和重复性。
5、温育功能(部分型号)
板内温育:一些高级的半自动酶标仪具备温育功能,可以将微孔板加热并恒定在特定温度(如37°C)。
应用:用于需要在恒温条件下进行的免疫反应或酶促反应,减少对额外恒温箱的依赖,提高实验效率。
“半自动”的体现
与全自动酶标仪相比,半自动酶标仪的“半自动”主要体现在:
人工加样:样本和试剂的加入完q依赖手动移液器完成。
人工放置:用户需要手动将微孔板放入仪器的板架中。
人工选择:波长选择、程序设置等通常需要用户在仪器面板上手动操作。
无自动化处理:不具备自动洗板、自动进样、机械臂抓取等高度自动化功能。