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如何鉴定酶标仪的性能,看完这一篇就明白了

点击次数:2041发布时间:2018-06-29
近年来,酶标仪在临床实验室中的应用越来越普及,使得酶免疫分析法(EIA)的自动化程度及性愈来愈高,尤其是近几年,进口的、国产的单、多通道全自动酶标仪的种类及型号发展非常迅猛,是临床实验室自动化程度继生化分析仪、血细胞计数仪、血凝仪等之后的又一次更新和提高。然而,国内外有关酶标仪性能系统评价的方法甚少,有的评价指标简单且不全面,有的对其性能评价所采用的方法不尽一致,导致不同仪器之间、厂家与用户之间、用户与用户之间的评价指标缺乏可比性,这是由于酶标仪在制造工艺(多通道检测器)、测定原理(垂直光路光度测定法)与其它水平光路光度测定的仪器(721分光光度计)之间存在着很大的差别。针对这个状况,我们初步建立以下的性能鉴定方法,希望对大家有所帮助。
测定的吸光度范围
通常,酶标仪的吸光度测定范围在0——2.5之间即可以满足ELISA的测定要求。早期的酶标仪可测定的吸光度一般在0——2.5之间,但现在基本上都做了拓宽,可达到3.5以上,并且能保持很好的精密度与线性。因此,对于酶标仪的吸光度范围不必去刻意追求大的吸光度范围,主要要看在一定的吸光度范围内的线性和精密度如何。
光学系统
酶标仪的光学系统采用的是垂直光路多通道(通常为8或12通道,亦有单通道)检测,一般为硅光管或光导纤维,除测定通道外,有的酶标仪还有一个参比通道,每次测定可进行自我校准。酶标仪的光学系统功能如何,均可通过酶标仪测定的吸光度范围、线性度、精密度和准确度等体现出来。光学系统好的话,则上述指标也应较佳。测定的精密度与测定通道之间的均一性有直接关系。单通道可避免因通道不同所致的差异。
检测速度
酶标仪的检测速度是指其完成比色测定所需要的时间。检测速度快,有利于提高检测的精密度,即避免由于测定过程中,因测定时间不同所致的各微孔间吸光度间的差异。目前市场上常见的酶标仪检测速度都非常快,通常在数秒钟内。
震板功能
酶标仪的震板功能是指酶标仪在对ELISA板孔进行比色测定前对其进行振荡混匀,使板孔内颜色均一。目前市场上常见的酶标仪均有震板功能,所不同的是震板方式,有的可按上下、左右或旋转等方式及振荡幅度等任意调节;有的则较为固定。使用有震板功能的酶标仪,在进行ELISA测定显色反应完成加入终止剂后,可不必振荡混匀,直接放人酶标仪上测定即可。
温育功能
温育功能是指酶标仪本身能按要求自动地控制仪器内部的温度,使得ELISA测定中微孔板条的温育过程可在仪器内部完成,而无需再外配温箱。目前,只有少部分酶标仪具有此种功能,温育功能只是酶标仪的一个附加功能,是否具有并不能说明酶标仪档次的高低及仪器的优劣。作为实验室是否选择,则可根据自己实验室的条件及需要来决定。
软件功能
软件功能是指酶标仪所具有的对ELISA定性和定量测定及其他测定方式如酶标动力学、紫外和凝集等数据的统计分析并报告结果的功能。软件功能是中酶标仪的一个非常重要的功能。如果硬件方面区别不大,则软件就成为判定酶标仪优劣的惟一指标。对于用户来说,好的软件功能,对实际工作会有较大的帮助。ELISA定性测定,酶标仪如具有阳性判断值(cut-off)及其测定“灰区”(即指测定吸光度处于cut—off周围的一定区域,此区域内结果应为“可疑”)的统计计算功能,不但方便了实验室工作人员,而且在某些特定的情况下,有很高的实用价值。因此,如目的是定量测定,则在酶标仪的软件功能中,要有这种曲线回归方程计算分析功能。其他诸如连点、直线等回归计算,则可根据酶标仪的应用目的而定,如兼用于微量生化测定,则此类回归计算就很有必要。
此外,酶标仪兼做酶标动力学、凝集反应测定所需的软件是否应具备,当然也应根据使用目的而定。由于此类软件一般都较为昂贵,酶标仪常另外单独按需配备,如果不是实验室特殊需要,就不必强求这种软件功能。
语言界面
通常进口的中酶标仪人机对话多采用英文。这对于某些基层实验室可能会存在语言方面的困难,从而难以大限度地发挥酶标仪的作用。为解决这方面的问题,已有一些酶标仪采用了中文界面。这样就大大方便了广大基层实验室技术人员的使用。
综上所述,尽管酶标仪的发展极为快速,种类繁多,功能也不断加强,但其根本的功用是不变的,即比色测定。大凡比色测定,其基本要求就是在一定吸光度范围内要有好的测定准确性、线性和精密性。同样的吸光度范围,测定的准确性、线性和精密性越好则酶标仪亦越佳。
而且,由于用于酶标仪比色测定的为多孔(通常为96孔)微孔板条,为保证测定的孔间重复性,则测定速度也是一个较重要的性能指标。至于其他如震板、温育及有关的软件功能,则是选配功能,不影响酶标仪其他的使用性能。
在对酶标仪进行评估时,还应对仪器的自动化程度及售后服务有一个比较全面的了解。自动化程度如仪器的分辨率(一般为0.001A)、报告的方式(通常提供4——6种以上的格式)、可提供滤光片的大数目(有些厂家可根据用户要求订做)、是否提供用户自编程序及外接微机的功能和软件等等。
售后服务也是仪器使用顺利与否的根本保证,用户应当与信誉较好、服务周到、维修方便的代理商进行恰谈,以免仪器一旦出现故障,而不致于影响工作或使仪器处于瘫痪状态不能发挥应有的社会效益和经济效益。
另外需要强调的是:由于酶标仪的种类、型号繁多,每个仪器的测量原理也不尽相同,为了保证不同仪器之间测定结果的一致性,我们认为在测定时应采用双波长法,而且必须采用双波长,这样既能消除干扰组份和干扰因素的影响,又能避免因仪器测量原理不同而造成仪器之间结果的不一一致性。
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