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酶标仪性能评价

点击次数:1016发布时间:2017-07-28

1.滤光片波长精度检查及其峰值测定:用高精度紫外可见分光光度计(波长精度±

0.3nm)对不同波长的滤光片进行光谱扫描,检测值与标定值之差即为滤光片波长精度,其差值越接近于零且峰值越大表示滤光片的质量越好。

2.灵敏度和准确度:(1)灵敏度:加200µl  6µg/ml重铬酸钾溶液于小孔中,以0.05mo1

L硫酸溶液作空白,于450nm(参比波长650nm)测定,其吸光度应≥0.012)准确度:准确配制1mmol/L对硝基苯酚水溶液,以10mmo1L氢氧化钠溶液25倍稀释后加入200µl

于小孔杯中作空白,于405nm(参比波长650nm)检测,其吸光度应在0.4左右。

3.通道差与孔间差检测:(1)通道差检测:取一只酶标微孔杯以酶标板架作载体,将其内含200 μl甲基橙溶液,吸光度0.5左右先后置于八个通道的相应位置,蒸馏水调零,采用双波长(测定波长490nm,参比波长630nm650nm)连续测三次,观察其不同通道之间测量结果的一致性(2)孔间差的测量:选择同一厂家、同一批号酶标板条(8条共96孔)分别加入200µl甲基橙溶液(吸光度调至0.0650.070)先后置于同一通道,蒸馏水调零,采用双波长检测,其误差大小用±1.96s衡量。

4.零点飘移:取8只小孔杯,分别置于8个通道的相应位置,均加入200µl蒸馏水并调零,采用双波长或单波长(490nm)每隔30min测定一次,观察8个通道4h内的吸光度变化,其与零点的差值即为零点飘移。

5.精密度评价:每个通道3只小杯,分别加入200µl高、中、低三种不同浓度的甲基橙溶液,蒸馏水调零,采用双波长作双份平行测定,每日测定两次,连续测定20天。分别计算其批内精密度、日内批间精密度、日间精密度和总精密度及相应的CV值。

6.线性测定:准确称取甲基橙配制5个系列浓度的溶液,采用双波长平行检测8次,求其均值。计算回归方程、相关系数r及标准估计误差Sy,x,并用±1.96Sy,x表示样品的95%测量范围。

7.双波长评价:取同一厂家、同一批号酶标板条(每个通道2条共24孔)每孔加入200µl

甲基橙溶液(吸光度调至0.0650.070 )先后于8个通道分别采用单波长(490 nm)和双波长(测定波长490nm、参比波长630 nm650nm)进行检测,计算单波长和双波长测定结果的均值、离散度,比较各组之间是否具有统计学差异以考察双波长清除干扰因素的效果。

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